カスタムラビットscFv抗体作製サービス
バイオピーク独自の組換え抗体作製技術を用いて、お客様の抗原に結合するウサギscFv組換えモノクローナル抗体を作製する受託サービスです。抗原を免疫したウサギのリンパ組織から抗体ライブラリーを構築し、大腸菌に遺伝子導入後、コロニー形成・抗体発現・抗原抗体反応検出・クローニングを同時に行う、抗体ダイレクトクローニング法により、高親和性のラビットscFv抗体を取得します。
サービスの特徴
・ ウサギのモノクローナル抗体を取得できる
・ ウサギに免疫を行うことで、高親和性のモノクローナル抗体を取得できる
・ 疑陽性がないため、実用可能な陽性クローンを多数取得できる
・ 抗体ライブラリーの作製後、短期間（1週間）目的クローン樹立可能
・ 目的抗体産生クローンを失うリスクがない
ご使用目的
・ 短期間でモノクローナル抗体が欲しい
・ ファージディスプレイ法でscFvのパニングを行なったが上手く行かなかった
・ マウス以外のモノクローナル抗体が欲しい
・ 従来抗体が使えない特殊な条件でもワークする抗体が欲しい
受託サービスの流れ
抗体作製の流れ
作業概要
| 作業ステップ | 期間 | 納入価格 | |
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1 |
免疫（ウサギ） | 2-9週間 | お問い合わせ |
| 2 | リンパ組織の摘出 |
1週間 （ライブラリー構築） |
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| 3 | RNA抽出、cDNA合成 | ||
| 4 | cDNAを鋳型にVH 遺伝子、VL遺伝子を増幅 | ||
| 5 | 抗体ダイレクトクローニング用ベクターにVH遺伝子、VL遺伝子を挿入 | ||
| 6 | VH遺伝子、VL遺伝子を連結し、専用ベクターに挿入し、scFv遺伝子ライブラリーを構築 | ||
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7 |
scFv遺伝子ライブラリーを、ダイレクトクローニング用大腸菌に遺伝子導入（ライブラリーサイズ107～） |
2-3週間 （抗体ダイレクトクローニング） |
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| 8 | 寒天培地上のフィルターサンドイッチにライブラリーを播種し培養 | ||
| 9 | 検出用フィルターから、陽性クローンのスポットを検出 | ||
| 10 | 検出スポットとコロニーフィルターを重ね合わせ、陽性クローンを同定 | ||
| 11 | 陽性クローンを液体培養 | ||
| 12 | 評価用培養上清納品、お客様による評価 | ||
| 13 | 選択いただいたクローンの抗体遺伝子配列解析 |
1週間 （配列解析） |
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| 14 | 抗体遺伝子配列情報のご報告 | 納品 |
ご提供頂きます試料
・抗原 3mg以上（免疫・抗体価測定・抗体ダイレクトクローニング用）
追加可能作業（参考例）
・抗原作製
・陽性クローンの追加
・取得抗体遺伝子の発現ベクター作製（抗体遺伝子をご希望のベクターに組込みます）
・取得抗体のIgG化・Fab化
抗体ダイレクトクローニング法とハイブリドーマ法の比較
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